化妝品防腐效能試驗(yàn)檢測(cè)——ASTM法
2017-01-18 10:35:19
天緯化學(xué)
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ASTM法 這種方法主要應(yīng)用于對(duì)經(jīng)防腐和未經(jīng)防腐樣品的比較檢驗(yàn)。ASTM提供了一系列可使用的微生物。這種方法使用的細(xì)菌保存在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，酵母菌和絲狀真菌保存在Mycophil瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度分別為32℃和25℃，菌種每月轉(zhuǎn)接一次。試驗(yàn)所使用的菌體必須是新鮮的，即細(xì)菌在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上于37℃培養(yǎng)24h-48h，酵母在25℃下培養(yǎng)48h，絲狀真菌在25℃下培養(yǎng)7天-14天（至產(chǎn)生池子）。這種方法要求在接種細(xì)菌時(shí)用無(wú)菌接種環(huán)將微生物轉(zhuǎn)移到無(wú)菌蒸餾水中，在425nm下控制濃度為1×10的8次方細(xì)菌mll。在接種霉菌時(shí)，用接種環(huán)或無(wú)菌玻璃棒輕輕接觸霉菌培養(yǎng)物將孢子取出，然后用無(wú)菌的不吸水的棉花過(guò)濾除去菌絲體，并打散抱子，再用血球計(jì)數(shù)器控制孢子在1×10的７次方個(gè)ml的水平。ASTM方法取樣時(shí)將待測(cè)樣品以100g為一份，取3份裝入帶有玻璃珠的容器中。每份樣品加入lm的微生物懸浮液（菌液的最終濃度為1×10的6次方細(xì)菌ml或1×10的8次方酵母ml，混合后的樣品于室溫下保存，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（0，7，14，28天）取一份混合樣與9份Letheeb肉湯混合，采用10倍稀釋溶液，傾注法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，培養(yǎng)時(shí)間和溫度同前，最后以第一平板上的菌落數(shù)，得到每克檢驗(yàn)產(chǎn)品的存活的微生物數(shù)目。有時(shí)化妝品會(huì)反復(fù)受到暴露或污染。在這種情況下，ASTM方法建議在28天后再進(jìn)行防腐試驗(yàn)，這種重復(fù)檢驗(yàn)，可以對(duì)消費(fèi)者使用過(guò)程中產(chǎn)品污染的潛在問(wèn)題作出更好的預(yù)測(cè)。例如，它對(duì)確定手和身體用清洗液的污染和頻繁使用的睫毛膏的污染都很重要。重復(fù)防腐性檢驗(yàn)或再培養(yǎng)可以顯示某種特定產(chǎn)品的防腐系統(tǒng)失效前，產(chǎn)品能經(jīng)受住多大的損害。
ASTM要求G-和G+細(xì)菌和酵母菌，在防腐性檢驗(yàn)后7天內(nèi)至少降低99.9%。本試驗(yàn)的后期微生物不應(yīng)有什么增長(zhǎng)，真菌在28天內(nèi)應(yīng)降低90&，并且試驗(yàn)期間不應(yīng)該出現(xiàn)增長(zhǎng)現(xiàn)象，未經(jīng)防腐的樣品在這兩項(xiàng)指標(biāo)方面都不合格。ASTM是通過(guò)在平板上觀察被測(cè)菌有無(wú)生長(zhǎng)的現(xiàn)象，來(lái)檢驗(yàn)培養(yǎng)基對(duì)防腐劑的中和效果的。具體做法是：用經(jīng)混合接種的營(yíng)養(yǎng)肉湯的培養(yǎng)物以10的-1次方、10的-2次方和10的-3次方的菌濃度進(jìn)行平板劃線。這種混合接種物可以是G-、G+及酵母，或是絲狀真菌混合物，在32℃培養(yǎng)18h--24h，或25℃培養(yǎng)72h后無(wú)生長(zhǎng)的現(xiàn)象就表明沒(méi)有對(duì)殺菌劑起中和作用。
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